近年來,食品安全欺詐問題日益突出,尤其是肉制品的摻假現(xiàn)象屢見不鮮。本文簡要說明使用PCR檢測技術(shù)對(duì)羊肉產(chǎn)品中若干動(dòng)物源性成分的檢測方法。
關(guān)鍵詞:基因組DNA樣品;凝膠成像系統(tǒng);PCR儀
1. 概要
食品安全欺詐問題給消費(fèi)者的身體健康和合法權(quán)益造成嚴(yán)重威脅。在肉類產(chǎn)業(yè)中,羊肉作為重要的組成部分,其摻假現(xiàn)象越來越普遍。因此,建立一種可靠準(zhǔn)確的羊肉產(chǎn)品動(dòng)物源性成分檢測方法具有重要意義。
2. 試驗(yàn)材料
2.1 羊肉樣品:羊肉制品樣本。
2.2 基因組DNA樣品提取試劑盒:包括天根DNA提取試劑盒、DNA純化柱等。
2.3 PCR試劑盒:包括PCR反應(yīng)液、DNA引物等,電泳試劑
2.4 實(shí)驗(yàn)室儀器包括:朗基PCR儀,Tanon凝膠成像儀,水平電泳槽,電泳儀電源,高速離心機(jī)
3. 試驗(yàn)方法
3.1 樣品的準(zhǔn)備
將購買的羊肉制品樣本切碎,取樣品重量為10g,放入1.5mL離心管中備用。
3.2 DNA樣品提取
按照天根基因組DNA樣品提取試劑盒說明書中的操作步驟,從樣品中提取DNA樣品。將提取得到的DNA樣品置于-20°C保存?zhèn)溆谩?/span>
3.3 七重PCR檢測
3.3.1 PCR反應(yīng)體系準(zhǔn)備
按照PCR試劑盒說明書中的操作步驟,將所需的試劑按比例混合,制備PCR反應(yīng)液。將PCR反應(yīng)液分裝至PCR試管中,每管20μL。
3.3.2 PCR反應(yīng)條件設(shè)置
將PCR試管放入朗基PCR儀中,設(shè)置以下PCR反應(yīng)條件:預(yù)變性程序,95°C,5分鐘;40個(gè)循環(huán):94°C,30秒;56°C,45秒;72°C,45秒;最終延伸程序,72°C,10分鐘。
3.3.3 凝膠電泳分析
將PCR反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)凝膠電泳分析,并使用天能凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行觀察和記錄。
4. 結(jié)果分析
通過七重PCR檢測技術(shù),對(duì)羊肉制品樣本進(jìn)行了動(dòng)物源性成分的檢測。根據(jù)凝膠電泳結(jié)果,對(duì)不同樣本中檢測到的成分進(jìn)行鑒定和定量分析,確定是否存在摻假現(xiàn)象。分析結(jié)果表明,PCR檢測技術(shù)能夠準(zhǔn)確可靠地鑒定羊肉制品樣本中的動(dòng)物源性成分。
本研究基于PCR檢測技術(shù)建立了一種羊肉產(chǎn)品中動(dòng)物源性成分的檢測方法。通過實(shí)驗(yàn)證明,該方法能夠準(zhǔn)確鑒定羊肉制品樣本中的成分,并有效地檢測出是否存在摻假現(xiàn)象。這一方法在食品安全監(jiān)管和消費(fèi)者權(quán)益保護(hù)方面具有重要的應(yīng)用前景。
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