抗體(antibody)是指機(jī)體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護(hù)作用的蛋白質(zhì)。它(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面。抗體能識(shí)別特定外來物的重要特征,該外來目標(biāo)被稱為抗原。
抗體是免疫蛋白質(zhì),在宿主對(duì)病毒、細(xì)菌和真菌等感染性病原體的防御中發(fā)揮著基本作用。這些Y型蛋白質(zhì)的免疫功能是由其結(jié)合抗原的能力決定的,抗原是由細(xì)胞釋放的或在細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)的刺激免疫反應(yīng)的分子。
除了在宿主免疫中的作用,抗體在研究和治療方面也被證明是有價(jià)值的。兩種類型的抗體,多克隆抗體和單克隆抗體為研究人員提供了檢測或量化目標(biāo)抗原的不同方法,主要是由于特異性和親和力的不同。
定義多克隆抗體和單克隆抗體有用性的兩個(gè)關(guān)鍵特征涉及它們各自對(duì)抗原的特異性和靈敏度。
抗體的特異性是由其結(jié)合域和目標(biāo)抗原之間的相對(duì)親和力決定的,而其他分子是存在的。對(duì)這種特異性的利用對(duì)免疫學(xué)研究人員和臨床醫(yī)生來說是至關(guān)重要的,因?yàn)樵S多應(yīng)用都是利用多克隆和/或單克隆抗體來專門檢測目標(biāo)分子。結(jié)合抗原特異性,抗體的靈敏度是一個(gè)重要的參數(shù),決定了它在實(shí)驗(yàn)室的實(shí)用性。
高靈敏度的抗體非常適用于診斷應(yīng)用,如免疫沉淀、West Blot和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),因?yàn)樗鼈兡軌蜃R(shí)別低水平的目標(biāo)抗原。
單克隆抗體(monoclonal antibody, mAb):就是指由單一B細(xì)胞(其基因僅能編碼一種抗體)克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原表位的抗體。
單克隆抗體是通過將抗原注入到宿主動(dòng)物體內(nèi)啟動(dòng)機(jī)體免疫應(yīng)答而產(chǎn)生的。因而制作單克隆抗體的大多數(shù)操作都是在體外將來自這些宿主的脾細(xì)胞與培養(yǎng)的惡性骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。將細(xì)胞克隆分離出來,融合步驟中存活下來的細(xì)胞稱為雜交瘤。雜交瘤因骨髓瘤特性而可以永生,且容易在培養(yǎng)物中繁殖。
多克隆抗體:用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動(dòng)物,可刺激機(jī)體多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對(duì)多種抗原表位的不同抗體。所獲得的免疫血清實(shí)際上是含有多種抗體的混合物。
多克隆抗體的第一步和單克隆抗體一樣,都是將免疫原注射到宿主體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng),激活了多種B細(xì)胞。不同的是免疫過后,多克隆抗體就直接從免疫宿主的血清中分離出來,或純化,沒有與骨髓瘤細(xì)胞融合的過程。一旦宿主動(dòng)物死亡,需要免疫新的動(dòng)物,這時(shí)血清中的抗體就會(huì)有所不同。
單克隆抗體與多克隆抗體之間的關(guān)鍵區(qū)別
屬性 | 單克隆抗體 | 多克隆抗體 |
抗體群體 | 同質(zhì)性 | 異質(zhì)性 |
結(jié)合特異性 | 識(shí)別目標(biāo)抗原上的單一表位 | 識(shí)別目標(biāo)抗原上的多個(gè)表位 |
靈敏度 | 蛋白質(zhì)定量方面靈敏度高 | 對(duì)低數(shù)量的蛋白質(zhì)有較高的靈敏度 |
交叉反應(yīng) | 特異性高,交叉反應(yīng)低 | 存在生物物理多樣性,交叉反應(yīng)高 |
生產(chǎn)成本 | 昂貴 | 低廉 |
來源 | 受刺激的B細(xì)胞的單系:雜交瘤 | 受刺激的B細(xì)胞的多個(gè)系別 |
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